解决方案
SOLUTION
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基因扩增实验又称 PCR 实验，其特点是能将微量的 DNA 大幅增加， PCR 是分子生物学研究和实验的常规方法，广泛应用于生物学各个领域，例如：检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测和诊断， DNA 指纹、个体识别、子鉴别及法医物证，动、植物检疫，动物及其衍生产品检测，动物饲料、化妆品、食品卫生检测，转基因作物与转基因微生物检测等。 一、 PCR 实验室平面布局 基因扩增实验室又称 PCR 实验室，实验室原则上分为4个单独的工作区域，前两区为扩增前区，后两区为扩增后区。扩增前区与扩增后区应严格分开。实验材料、试剂、记录纸、笔、清洁材料等，只能从扩增前区流向扩增后区，即从试剂准备区﹣样品制备区﹣→扩增区﹣扩增产物分析区，不得逆向流动。实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区，不得逆向流动。各工作区域应设置缓冲间，工作间与缓冲间之间宜安装连锁装置。不同功能的核酸检验工作区应是分隔独立的工作室，并有明显的标志，各区间不能直通。各区之间如果是紧密相连，需安装物品传递窗。每个工作区域的顶部应安装紫外灯，紫外灯的波长为254nm，安装数量为每20m2安装一支40W的紫外灯。 实验室较为理想的布局模式为有一个专用走廊，试剂准备区、样品制备区、扩增区和产物分析区很规范地排列在一起，前三个区各有一个缓冲间，可供换工作服和工作鞋使用，顶上可装一紫外灯。内实验区域设为正压或常压状态，缓冲间内设为负压状态（可上设一抽风装置），使这三个区的空气流向为由实验区域内向外，缓冲间内通向内实验室和走廊的门可安装一种连锁装置，当一个门打开时，另一门必须处于关闭状态，防止出现两个门同时打开的情况。产物分析区可不设缓冲间，但应设为负压状态（装一个排风扇即可），使空气流向由外向内，以防止扩增产物的随空气流出。每一区域都须有明确的标记，工作按试剂准备区、样品制备区、扩增区至产物分析区单一流向进行，各区的仪器设备包括工作服、鞋、实验记录本和笔等都必须专用。如果无法做到以上模式，以下基本要求必须做到： (1）四个区域必须是相互独立的。 (2）各区的仪器设备及各种物品必须是专用的。 (3）各区完全独立，缓冲间可有可无。如为一个区套一个区的模式，区间不能直通，应有缓冲间，供换工作服及鞋子用，并保证两个区域间始终处于完全的分隔状态。 (4）产物分析区应安装排风扇或其他抽风装置，维持负压。 二、各区功能及主要设备 (1）试剂准备区：扩增试剂的配制、分装和保存。未设缓冲间的和准备区，工作区域为正压。用于扩增的试剂应冰冻储存。主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器、紫外灯。 (2）样品制备区：实验室样品的混样和测试样品的制备。未设缓冲间时工作区域为负压或减压，可安装排风系统。所用的器具在使用前应经过彻底清洗并消毒，防止交叉污染。主要设备有冰箱、生物安全柜（或洁净工作台、排风柜）、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴、上下水设备、废弃物容器、紫外灯。根据制备样品的性质和要求决定操作台是选用生物安全柜、洁净工作台还是排毒柜，如疾控中心、临床医学实验室一般选用生物安全柜，植物转基因、检疫等可选用排毒柜，样品制备需要较高洁净条件的选用洁净工作台。 (3）扩增区： PCR 扩增反应体系的配制和模板的加入，核酸扩增。未设缓冲间的扩增区，工作区域为负压或减压，可安装排风系统。加样应在超（生物安全柜）内进行，超净工作台的气流方向宜选择垂流式。核酸扩增设备、冰箱、洁净工作台（生物安全柜）、离心机、加样器、废弃物容器、紫外灯。 (4）扩增产物分析区：扩增产物的测定。未设缓冲间的扩增产物区，工作区域为负压或减压，应安装排风系统。若实验仅采用全自动扩增检测仪（如实时荧光定量 PCR 仪），可将扩增区与扩增产物分析区合并为一个区。本区所使用的仪器设备有酶标仪、洗板机、加样器和浴箱等。
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